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Andor Dragonfly 高速共軛焦影像系統

雷射光層掃描顯微鏡系統

德國 LaVision Biotec 的新一代 UltraMicroscope II 使用於澄清後的生物組織器官或活體樣本, 尺寸可達1.2x.1.2x1.0 cm

最新6束層光多角度掃描技術, 消除陰影, 使成像清晰.

應用範圍從組織器官的全貌型態與結構, 到細胞分子層級的解析.

配合完整的組織器官澄清程序, 提供 LifeCanvas 的 SmartClear II 及 SmartLabel 澄清及染色系統, 使用人員可以得到最佳的超解析影像.

 

 


德國LaVision BioTec UltraMicoscope II 目前是最搶手的層光掃描顯微鏡, 其運用了可選擇性雷射光光層照明(lSelcetive plane illumination microscope, SPIM)技術, 是全球唯一可以實現超大樣品、快速掃描、深度成像、超高解析、3D動態圖像輸出的螢光顯微鏡.

 

建構在實體顯微鏡上, 專利的 Triple sheet optics, 提供最佳的雷射光掃描. 採用高解析高分辨率物鏡, 在長工作距離下, 可以置放更大的生物樣本達 1 cm 以上. 使用人員可依應用需求, 配合螢光染劑, 搭載雷射光源, 405 nm, 488 nm, 561 nm, 639 nm, 785 nm ( 其他波長另選配之 ) .


現代的生物組織澄清透明化技術, 日愈蓬勃, 尤其在美國 MIT K. Chung Stanford K. Diesseoth 推出Clarity , 延伸發展 MAP, SWITCH 等技術, 可在不用切片的情況下, 做組織器官的全貌成像, 進而達到細胞分子層級的解析.  UltraMicoscope II 即是最後關鍵的成像設備. Clarity技術是一種將完整組織以化學轉型(chemical transformation)方式變成組織水膠混合體(hydrogel-tissue hybrid)的流程,使樣品可讓任何光源穿透,並且維持組織內的細部結構及分子組成,此一成果讓各種螢光染劑在完整組織上使用變為可能。 將完整組織轉型成光學級透明化並足以使螢光穿透之水膠混和組織,在不傷害組織的情況下,進行螢光染色及高解析3D影像拍攝.

使用 UltraMicroscope II Light-sheet microscope 具有下列使用上的優勢 :

1.         完整器官成像的全新領域 人們可以對完整大腦進行化學、遺傳學和光學分析,而這些研究此前只能在組織切片上進行。

2.         能夠在保持神經結構連續性的同時,研究亞細胞的蛋白質和分子,分析遠端回路、局部回路和細胞空間聯繫。

3.         將轉變我們研究大腦的方式,重要器官的深入研究將不再受到二維方法的限制。”此前,要在高分辨上研究大腦的內部結構,人們需要將大腦組織切成極薄的切片,而這樣會切斷大腦中的回路。這種缺乏完整性的方法,使人們很難將微觀發現與宏觀現象關聯起來。

4.         完整透明的3D大腦,大腦中的神經元、軸突、樹突、突觸、蛋白、核酸等等都完好的維持在原位




 

 

 

Sheet optics

Illumination

Uni- & bidirectional

Number of light sheets

3 – 6

Thickness

4 µm – 24 µm

Width

1 mm – 20 mm

Numerical aperture

0.0135 – 0.135

Focus positioning

Dynamic

Refractive index matching

1.33 – 1.56

Zoom microscope for 2x

objective lens

Zoom

Mono zoom

Zoom ratio

0.63x – 6.3x (1:10)

 

 

 

 

 

Detection optics

Objective lenses

2x

4x

20x

Numerical aperture

0.5

0.3

0.35

FOV diagonal (mm)

1.7 - 17.6

5.4

1.1

Total magnification (objective lens +

zoom ratio)

1.26x – 12.6x

(w/o Zoom)

(w/o Zoom)

Working distance

4 mm, 6 mm,

10 mm

6 mm

2.5 mm

Refractive index matching

1.33 – 1.56

Chromatic detection

Eight filters

Chromatic correction

Dynamic 400 nm – 850 nm

 

 

 

Detector

Type

sCMOS

Pixel

2560 x 2160

Pixel size

6.5 µm x 6.5 µm

Maximum frame rate

100 fps @ full frame

Read noise

1 e-

 

Imaging chamber

Imaging solution

aqueous buffers and organic solvents

Sample travel range (X, Y, Z)

1 cm, 1 cm, 1 cm

Sample size

µm Range to cm Range

 

Light source

Laser module

Max. 5 Laser Lines , 50 mW - 100 mW per diode

Supercontinuum laser

Emission 460 nm – 800 nm, 1 mW/nm – 3 mW/nm

Dimensions

54 cm x 70 cm x 65 cm (W x H x D)

Weight

47 kg (w/o controller and laser)







工欲善其事, 必先利其器. 單有 Light sheet scanning microscope 還不夠, 樣本必須澄清透明化. 所以, 我們提供一系列的樣本澄清設備, 包括被動式的澄清 及 主動式的澄清電泳裝置, 更有 Smat-Label 新世代的染色系統, 省時省力, 卻能得到最好的樣本. 歡迎洽詢 ................









UltraMicroscope II 
使用上極為簡易, 可快速且方便的研究生物型態及組織, 例如果蠅, 線蟲, 小鼠大腦、淋巴結 , 尤其在生物發生學上, 可以有效的紀錄整個器官組織的生長過程. 例如, 研究人員可以在很短的幾分鐘內, 完成齧齒動物皮膚腫瘤的血管形成成像。




Fascia
Stack Size: 1664 µm
Step Size: 4 µm





Easy-Index ( LifeCanvas/USA ) 源自美國 MIT 設計, 價位低, 效果佳, 是組織器官澄清的關鍵之一, 不僅適用於 Light sheet microscope, 也可用於 共軛焦顯微鏡, 雙光子成像系統, 也可應用於顯微鏡的光切及 3D 重建. 當然, 也可取代目前的顯微鏡用油, 歡迎洽詢試用..................


樣本浸漬於 Easy-Index, 吻合折射率, 樣本透明清晰, 提升成像品質.
Sample chamber : 1 x 1 x 1 cm ( WxDxH )
電控 XYZ 載物台, 可以電控調整樣本照明位置.







UltraMicroscope II  articles

1)      Whole-brain imaging with single-cell resolution using chemical cocktails and computational analysis

Susaki EA, Tainaka K, Perrin, Kishino F, Tawara T, Watanabe TM, Yokoyama C, Onoe H, Eguchi M, Yamaguchi S, Abe T, Kiyonari H, Shimizu Y, Miyawaki A, Yokota H, Ueda HR;

Cell. 2014 Apr

 

2)      Apoptosis Imaging for Monitoring DR5 Antibody Accumulation and Pharmacodynamics in Brain Tumors Noninvasively

Weber TG, Osl F, Renner A, Pöschinger T, Galbán S, Rehemtulla A, Scheuer W;

Cancer Res. 2014 Apr

 

3)      Multispectral fluorescence ultramicroscopy: three-dimensional 

visualization and automatic quantification of tumor morphology, drug penetration, and antiangiogenic treatment response

Dobosz M, Ntziachristos V, Scheuer W, Strobel S; Neoplasia. 2014 Jan

 

4)      Three-dimensional evaluation of retinal ganglion cell axon regeneration and pathfinding in whole mouse tissue after injury

Luo X, Salgueiro Y, Beckerman SR, Lemmon VP, Tsoulfas P, Park KK; Experimental Neurology. 2013 Mar

 

5)      Three-dimensional imaging of solvent-cleared organs using 3DISCO
Ertürk A, Becker K, Jährling N, Mauch CP, Hojer CD, Egen JG, Hellal F, Bradke F, Sheng M, Dodt HU;

Nature Protocols . 2012 Oct





在正常的病理條件下, 要瞭解人類器官的生長機制, 必須取得人類胚胎發育過程中的精確的細胞和分子圖譜, 你可參考下列最新發表的文獻


Tridimensional Visualization and Analysis of Early Human Development

Morgane Belle, David Godefroy, Gérard Couly, Samuel A. Malone, Francis Collier, Paolo Giacobini, Alain Chédotal

CELL, Volume 169, Issue 1, p161–173.e12, 23 March 2017

http://www.cell.com/fulltext/S0092-8674(17)30287-8 


3D Analysis of Peripheral Nervous System Development in Human Embryos

All panels are LSFM images of solvent-cleared embryos and fetuses.

(A) Surface shading image (left) and Prph labeling of peripheral nerves (right) at GW7.

(B) Overlay of the surface shading image (gray) and Prph labeling (green) at GW8.

(C) High-magnification images of Prph+ innervation at GW8. The middle and right panels are overlays of the surface contrast image (gray) and Prph labeling (green).

(D) GW9.5 thumb labeled for Prph and Tag-1. The two markers co-localize but the thinnest branches (arrowheads) are better labeled with Tag-1.

(E) Dorsal view of a GW9.5 hand double labeled for ChAT (motor axons) and Prph (sensory axons), showing the lack of co-localization.

(F) Dorsal view of a GW9 foot labeled for ChAT and Tag-1. The two markers are not co-expressed.

(G) Right view of the head and cranial nerves at GW7 (Prph staining). On the right panel, cranial nerves are segmented and highlighted with specific pseudo-colors.

Abbreviations: N, nostrils; M, mouth; V2 (maxillary) and V3 (mandibular), second and third branches of the trigeminal nerve.

Scale bars, 1,000 μm in (A) and (G), 2,000 μm in (B), 500 μm in (C), 300 μm in (D), 200 μm in (E), and 150 μm in (F).

 

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